Acta Pharm Sin B (IF=14.903) 南京鼓楼病院/南京年夜学研究团队发明SHP2卵白促成骨枢纽关头炎进展的新机制

骨枢纽关头炎(OA）是一种病发率很高的疾病。在疾病进展历程中会陪同着软骨退行性变、软骨下骨重塑以及滑膜炎等体现。OA进展历程中滑膜炎可加快软骨退变，滑膜炎的病理学特色包孕滑膜增生、巨噬细胞浸润以及新生血管的天生。含有Src同源性2的卵白酪氨酸磷酸酶2 (SHP2)是一种广泛表达的非受体卵白酪氨酸磷酸酶。SHP2在生物体发育和相应生长以及刺激因子的心理以及病理反映中起主要作用，咱们以前的研究注解，SHP2经由过程调治DOK1-UPP1-尿苷轴加重了软骨分化代谢以及合成代谢之间的不服衡，但尚不清晰SHP2是否影响枢纽关头微情况中的免疫细胞，尤为是巨噬细胞来调治OA的进展。

近日，南京年夜学医学院从属鼓楼病院运动医学与成人重修外科团队以及南京年夜学生科院团队互助在国际学术期刊《Acta Pharmaceutica Sinica B》(IF=14.903)上揭晓题为“Targeting macrophagic SHP2 for ameliorating osteoarthritis via TLR signaling”的文章，发明髓系细胞前提敲除了Shp2基因可经由过程削减滑膜M1型巨噬细胞极化并降低滑膜炎严峻水平，从而延缓骨枢纽关头炎，或者可为骨枢纽关头炎的医治提供新的医治靶点。

研究要领与成果

1 OA病人与DMM小鼠的滑膜炎严峻水平以及M1型巨噬细胞数目显著升高

DMM模子以前一直被以为是一种低炎症反映型的OA模子，本课题发明DMM模子构建后两周最先便呈现了滑膜炎评分的显著升高，同时陪同着巨噬细胞尤为是M1型巨噬细胞的浸润。

2 SHP2卵白在OA病人及DMM小鼠的滑膜中高表达并高度定位于巨噬细胞

接下来咱们为了验证SHP2卵白是否介入到了OA的疾病进展，咱们对于OA病人以及DMM的小鼠滑膜举行了免疫荧光的染色，成果发明SHP2卵白在OA病人及DMM小鼠的滑膜中高表达，而且该卵白的表达高度定位于DMM小鼠的滑膜巨噬细胞中。

图2.SHP2卵白在OA病人及DMM小鼠的滑膜中高表达并高度定位于巨噬细胞

3

巨噬细胞前提敲除了Shp2基因可显著按捺OA疾病进展

接下来，为了验证在滑膜巨噬细胞炎症历程中SHP2卵白是否起到了很是主要的作用，在本研究中构建了巨噬细胞前提敲除了Shp2基因的小鼠，成果发明在前提敲除了了该基因以后可显著按捺DMM小鼠模子中OA的疾病进展，并按捺M1型滑膜巨噬细胞的极化，同时可促成软骨相干卵白II型胶原卵白的表达，按捺X型胶原以及软骨降解相干卵白MMP3的表达。

图3.Shp2基因敲除了延缓DMM小鼠OA进展

4 使用SHP2卵白的变构按捺剂可显著按捺巨噬细胞炎症

此外，咱们也在体外举行了相干的试验，咱们使用了SHP2卵白的变构按捺剂对于巨噬细胞举行了刺激，咱们发明SHP099可显著按捺M1型巨噬细胞表型以及炎症相干因子如Il-一、Il-六、Tnf-a、iNos、Cxcl10等的表达，而且咱们在高表达SHP2卵白以后，M1型巨噬细胞相干的炎症卵白也显著高表达，这注解SHP2卵白在巨噬细胞炎症反映历程中起到很是主要的作用。

图4.SHP099经由过程按捺SHP2卵白功效起到按捺炎症反映的作用

5 SHP099多是经由过程TLR通路孕育发生潜在的医治效果

接着，咱们对于于体外刺激的巨噬细胞举行了RNA-seq组学检测，从而申明SHP099多是经由过程TLR通路孕育发生潜在的医治效果。

图5.SHP099经由过程按捺TLR通路进而按捺炎症因子的开释

吉凯助力

本文中RNA-seq测序技能及SHP2卵白的高表达慢病毒均由吉凯基因提供。SHP2慢病毒传染RAW264.7细胞，如图6所示，WB检测后SHP2卵白的表达显著升高，而且在LPS的刺激后M1型相干卵白显著升高，这提醒SHP2卵白在炎症反映历程中起到很是主要的作用。

图6. SHP2卵白高表达后显著促成M1型相干卵白表达

作者简介

本文通信作者为南京年夜学医学院从属鼓楼病院运动医学与成人重修外科史冬泉传授以及南京年夜学生科院孙洋传授。南京年夜学孙梓荧博士以及刘倩倩博士为配合第一作者。