甄别、活化NK

20世纪70年月，固有免疫的主要“军团”——NK细胞“千呼万唤始出来”，进入了科学家们的视线。NK细胞拥有快速辨认并断根遭到传染、癌变、外来或者应激细胞的能力，备受科研职员的存眷。NK细胞不仅可以经由过程开释细胞毒性颗粒杀伤肿瘤细胞，还可以迅速表达多种细胞因子以及趋化因子，有召募其它免疫细胞、促成T细胞以及B细胞的顺应性免疫反映等诸多功效。此外，NK细胞可以被IgG抗体激活，孕育发生抗体依靠性细胞介导的细胞毒效应，当特异性抗体联合到靶细胞膜后，NK细胞可经由过程细胞外貌的CD16与肿瘤特异性IgG抗体联合，辨认并杀伤与IgG抗体特异性联合的肿瘤细胞。以PD1抗体为代表的T细胞加强疗法在肿瘤医治取患上伟大乐成后， NK细胞疗法也逐渐引起人们的留意，更多的科研职员也存眷到CD16与NK细胞的临床研究。今天，小编就以及各人一路“盘”一下既能甄别NK细胞，又能引发ADCC反映的靶向份子——CD16。

CD16是甚么？

CD16即FcγRIII，是一个份子量为50000-70000道尔顿的糖卵白，属于Ig超家族成员。IgG的FcR家族由6个受体构成：FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIc、FcγRIIIa以及FcγRIIIb，此中CD16a重要卖力触发NK细胞介导的ADCC效应。CD16份子广泛表达于NK细胞、嗜中性多形核白细胞、单个核细胞以及巨噬细胞中，但在嗜碱细胞中不表达。抗CD16单克隆抗体可激活NK细胞抗体依靠性细胞介导的细胞毒性作用。

CD16与NK细胞的瓜葛？

作为最早在NK细胞外貌发明的标记物，CD16经常使用于界说NK细胞，为NK细胞的焦点标志之一，其他两个焦点辨认标志份子为CD3以及CD56。CD16不是经由过程GPI锚附着于NK细胞，而是彻底跨膜的，细胞质部门有ITAM基序。除了了标志NK之外，CD16还能促成NK细胞的增殖以及杀伤性细胞因子的排泄。

在辨别NK细胞时，人们每每会将CD16与NK细胞的另外一个主要标记物CD56结合使用。针对于这两个指标，研究职员开发了有多种贸易化抗体，运用于根蒂根基研究以及临床如体外诊断等多个范畴。按照CD1六、CD56表达的差异，可以将NK细胞分为两年夜亚型：CD56dimCD16+NK以及CD56brightCD16-NK。CD56brightNK-细胞是强有力的细胞因子孕育发生者，但缺少CD16a；而CD56dimCD16+ 具备高度的细胞毒性，能表达CD16a[1]。

差别亚型的NK细胞，在人体差别构造部位内的漫衍有所差别，并且特定部位的NK细胞功效具备特异性。CD56brightCD16-NK细胞重要漫衍于淋逢迎、扁桃体以及肠道中，呈现频率较低，0.1%–2%摆布；CD56dimCD16+ NK细胞重要漫衍于血液、BM、脾脏以及肺部，呈现频次较高，5%-50%摆布。

CD16介入抗体依靠性细胞毒性(ADCC)作用，其最显著的特性在于膜受体卖力触发的裂解是由NK细胞完成的。CD16a与IgG的CH2布局域1:1联合，此中CH2布局域上的N297位的N-聚糖链在这类彼此作用中起着要害作用。此外CH2布局与的聚糖构成也可能影响CD16a对于Fc的亲以及力，从而影响ADCC效应的阐扬。

与NK细胞的其他激活型受体差别，CD16与Fc的联合不需要协同激活。研究职员接纳抗CD16抗体刺激NK细胞活化时发明，ζ链发生酪氨酸磷酸化，引起胞浆内Ca2+浓度升高，IP3程度增长，从而促成细胞因子的合成以及ADCC作用，使患上NK细胞可以或许在病毒传染以及肿瘤形成的初期，经由过程抗体孕育发生免疫反映。

差别形态的CD16会影响NK细胞与抗体Fc真个亲以及力。好比，当CD16卵白中的第158位的氨基酸为苯丙氨酸时，与Fc的亲以及力低，而当该氨基酸突变为缬氨酸后，与Fc的亲以及力高。今朝的单克隆抗体研制历程中，年夜部门触及到抗体Fc真个润色，以促成抗体与CD16的联合，提高ADCC效应。别的，许多抗体生厂商使用的哺乳动物细胞造就系统都削弱了抗体Fc真个岩藻糖基化，以加强抗体与CD16份子的联合。

关于CD16的科研论著

2021年5月，意年夜利科学家Capuano等在《Cancer》杂志上揭晓的一篇综述指出，CD16触发的ADCC效应以及别离由NK细胞、单核/巨噬细胞介导的吞噬作用是单克隆抗体阐扬杀伤肿瘤细胞作用并到达医治效果的重要免疫依靠机制[2]。研究职员拟经由过程激活或者按捺NK细胞CD16受体调控单克隆抗体抗肿瘤反映，该研究结果有望运用于细胞免疫医治的精准节制。

2016年9月，Martin R. Goodier等人在《Front I妹妹unol.》期刊上揭晓以“Sustained I妹妹une Complex-Mediated Reduction in CD16 Expression after Vaccination Regulates NK Cell Function”为题的科研论文[3]。

研究职员发明，流感疫苗肌肉内接种后，体内抗体-抗原免疫复合物的交联，下调了NK细胞CD16的表达，限定了NK的细胞脱颗粒作用，按捺了NK细胞对于外源性细胞因子的反映能力。在这一历程中，研究职员还证明了ADAM17类卵白酶可以或许按捺CD16脱落，从而加强NK细胞细胞的细胞毒性功效。这项研究为CD16在NK细胞免疫医治方面斥地了潜在的运用。

提高NK细胞对于实体瘤的靶向特异性，为肿瘤患者提供更为有用的辅助医治计谋，是NK细胞药物开发的要害点。对于CD16的作用机理、协同作用份子和与旌旗灯号通路等的研究，为NK细胞免疫疗法的开发提供了新标的目的。

同立海源CD16单抗

1、产物上风：

人源化改造及细胞制备、GMP级出产

高纯度、高活性、高安全性、高不变性

ISO1348五、ISO9001质量系统认证

2、数据测试：

测试成果显示同立海源生物CD16单抗纯度到达药用级尺度

经验证同立海源生物CD16单抗与Jurkat细胞有很好的联合活性

参考文献：

[1] Co non L, Villalba M. From CD16a Biology to Antibody-Dependent Cell-Mediated Cytotoxicity Improvement. Front I妹妹unol. 2022 Jun 3;13:913215. doi: 10.3389/fi妹妹u.2022.913215.

[2] Capuano C, Pighi C, Battella S, et al. Harnessing CD16-Mediated NK Cell Functions to Enhance Therapeutic Efficacy of Tumor-Targeting mAbs. Cancers (Basel). 2021 May 20;13(10):2500. doi: 10.3390/cancers13102500.

[3] Goodier MR, Lusa C, Sherratt S, et al. Sustained I妹妹une Complex-Mediated Reduction in CD16 Expression after Vaccination Regulates NK Cell Function. Front I妹妹unol. 2016 Sep 26;7:384. doi: 10.3389/fi妹妹u.2016.00384.

关于同立海源

北京同立海源生物科技有限公司，建立十余年专注细胞以及基因医治上游GMP级原料试剂研发，致力于为生命科学提供靠得住的产物与办事。产物触及真核重组卵白、细胞分选试剂、无血清造就基、细胞造就试剂盒、东西酶。为细胞以及基因医治、mRNA开发、抗体药物开发、细胞贮存等生物制药以及IVD范畴提供焦点原料试剂与办事。

公司建有切合cGMP尺度的万级干净车间，包孕哺乳动物细胞表达卵白质工程平台、细胞造就技能开发平台、体外诊断试剂出产平台，经由过程ISO13485以及ISO9001双认证，部门产物已经获美国FDA DMF存案。

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