今天你运动了吗？近期“刘畊宏毽子操”刷爆伴侣圈，各人都成了“刘畊宏女孩”，随着一路抬脚！拍脚！侧边的肥肉咔咔失！可是天天对峙其实长短常艰巨，节食减肥又不康健，莫非就没有更好的减肥要领吗？近期，Cell Death Differentiation杂志在线揭晓了西安交通年夜学张燕团队题为“”的文章，注解Ddr2经由过程调治Adcy5-cAMP-PKA路子调治脂肪细胞脂解以及骨量。

揭晓期刊：Cell Death Differentiation

揭晓时间：2022.4

影响因子：15.82

互助单元：西安交通年夜学

百趣提供办事：游离脂肪酸

研究配景

肥胖是全世界面对的最主要康健问题之一，与高血压、冠芥蒂、2型糖尿病以及低骨量疾病等慢性疾病紧密亲密相干。很多肥胖患者有骨质松散的症状，包孕骨量削减、微布局转变以及骨脆性增长。骨质松散症会致使骨折危害增长，并极年夜地影响患者的糊口质量。是以，寻觅一个既能调治脂肪代谢又能调治骨量的靶点很是主要。愈来愈多的证据注解Ddr2与骨骼以及脂肪心理学有关，然而具体的机制还不清晰。

研究成果1.Ddr2前提性敲除了小鼠的代谢表型

Ddr2Adipo小鼠以及野生型比照组在3个月龄以及8个月龄时体型、体重、长度、体脂率、脂肪重量、肝脏均未发明显著变化。用高脂饮食喂养24周后，Ddr2Adipo小鼠体脂率、脂肪/瘦肉比、内脏脂肪重量、脂肪细胞体积显著降低，血清甘油三酯程度降低，而游离脂肪酸连结稳定。注解Ddr2Adipo小鼠免受 HFD引诱的脂肪增长。

图1. Ddr2Adipo小鼠的代谢表型2.Ddr2Adipo小鼠的骨量以及骨强度增长

为明晰解Ddr2缺掉是否对于骨骼有影响，对于股骨举行阐发发明，与WT比照组比拟，Ddr2Adipo小鼠的骨量显著增长。骨量增长凡是会放年夜整个骨骼的力学机能，是以举行了三点弯曲实验以确定骨强度，发明12周龄Ddr2Adipo小鼠的股骨较着变硬、屈就力加强、股骨极限力显著增长，注解Ddr2Adipo小鼠的骨量以及力学机能较着遭到引诱。

图2. Ddr2Adip小鼠骨量增长3.Ddr2Adipo小鼠的骨形成遭到刺激

经由过程苏木精以及伊红染色图象阐发，发明Ddr2Adipo小鼠中的立方形成骨细胞比WT比照组中更多。经由过程构造形态计量学阐发，发明当小梁外貌表达时，Ddr2Adipo小鼠的小梁骨形成加快。5-溴脱氧尿苷掺入实验注解，Ddr2耗竭后，成骨细胞的增殖没有遭到影响。此外，在Ddr2Adipo小鼠的骨构造以及原代颅骨细胞中，成骨标志物的mRNA程度显著增长。进一步注解，受刺激的成骨细胞活性有助于Ddr2Adipo小鼠的骨硬化表型。

图3. Ddr2Adip小鼠的骨形成遭到刺激4.Ddr2Adipo小鼠的骨接收被促成

经由过程抗酒石酸酸性磷酸酶染色研究发明，与WT比照组小鼠比拟，Ddr2Adipo小鼠的破骨细胞品貌增长。破骨细胞天生的经典标记物抗酒石酸酸性磷酸酶5b及其mRNA程度在Ddr2Adipo小鼠骨中显著上调。这些成果注解，因为骨形成的极年夜加快，Ddr2Adipo小鼠的骨量增长。

图4. Ddr2Adip小鼠的骨接收获得促成5.Ddr2Adipo小鼠骨髓脂肪削减

经由过程检测血清脂肪因子程度，发明Ddr2Adipo小鼠的骨硬化不是由代谢综合征引起的。经由过程成骨细胞分解引诱剂处置惩罚Ddr2Adipo骨髓基质细胞，发明脂肪细胞Ddr2缺掉对于骨髓基质细胞分解没有任何反馈作用，而且刺激Ddr2Adipo小鼠的成骨细胞分解不是由骨髓基质细胞的谱系选择引起的。

构造学阐发注解，Ddr2Adipo小鼠股骨中的骨髓脂肪构造、骨髓脂肪比例、脂肪细胞数目以及脂肪细胞巨细显著降低。Perilipin 1染色阳性细胞一致，Ddr2Adipo小鼠骨髓中的脂肪细胞也显著降低。使用试剂盒分散骨髓脂肪细胞，并测定mRNA表达，发明Ddr2Adipo以及WT细胞之间的脂肪分化基因显著增长。Ddr2 缺掉刺激甘油带动，注解脂解作用加强。检测骨髓FFA品貌，发明Ddr2Adipo小鼠骨髓中各类长链脂肪酸削减。

图5. Ddr2Adipo小鼠的骨髓脂肪削减6.Adcy5介导的脂解在Ddr2Adipo小鼠中被激活

对于骨髓脂肪细胞的转录组成果举行GO阐发，发明差异表达基因与细胞外貌受体旌旗灯号通路、腺苷酸环化酶按捺G卵白偶联受体旌旗灯号通路以及G卵白偶联受体旌旗灯号通路相干，并与环核苷酸第二信使偶联。经由过程火山图阐发，发明年夜大都差异表达基因在Ddr2Adipo小鼠中上调。基因富集阐发证明，介入调治脂解、脂肪消化以及接收、氧化磷酸化以及ECM受体彼此作用的掉调基因显著富集，并进一步在热图中确定介入这些历程的24个最上和谐下调的基因，qPCR证明并注解Adcy5是最显著上调的基因。这些数据注解脂肪分化以及Adcy5多是Ddr2Adipo小鼠刺激脂肪分化的缘故原由。

图6. Ddr2Adipo小鼠的脂解作用被激活7.脂肪细胞Ddr2经由过程Adcy5-cAMPPKA路子调治骨量

经由过程测定骨髓脂肪细胞Adcy5的主要下流效应物cAMP程度，发明Ddr2Adipo小鼠的cAMP程度显著升高。经由过程测定骨髓脂肪细胞中PKA活性以及Lipe磷酸化，发明PKA活性以及Lipe磷酸化在Ddr2Adipo小鼠的骨髓脂肪细胞中被显著引诱。在Ddr2缺掉的3T3-L1细胞中也不雅察到近似调治，而且FFA浓度显著增长。

为进一步研究Adcy5在缺掉Ddr2时对于脂质的调治作用，在Ddr2耗尽的3T3-L1细胞中滋扰Adcy5的表达，发明Adcy5敲除了显著下调FFA含量，Adcy5的过表达恢复FFA的含量。使用按捺剂来阻断颅骨细胞中的FFA摄入，发明与野生型细胞比拟，Ddr2Adipo小鼠颅骨细胞的成骨细胞基因表达增长，但在按捺剂存鄙人，Ddr2Adipo颅骨细胞中成骨细胞表达基因的上调被显著按捺。

经由过程腺苷酸环化酶按捺剂SQ22536来测试Adcy5以及cAMP按捺对于Ddr2Adipo小鼠骨量的影响，发明与比照比拟，Ddr2Adipo小鼠骨量光鲜明显降低，骨密度、骨量/整体积以及小梁数光鲜明显降落，而小梁分散光鲜明显升高，注解Adcy5介导Ddr2对于脂肪细胞脂解的调治，而Ddr2缺少会致使Adcy5上调和随之而来的脂解以及FFA含量，进而刺激成骨细胞分解以及骨量增长。

图7. 脂肪细胞Ddr2经由过程Adcy5-cAMP-PKA路子调治骨量图8. 3T3-L1细胞中的Ddr2敲低致使Adcy5上调、cAMP-PKA-Lipe激活以及随后的脂解作用图9. 腺苷酸环化酶按捺阻断Ddr2Adipo骨表型结论

综上所述，该研究初次注解，Ddr2在脂肪以及骨骼之间的串扰中起着至关主要的作用。份子证据注解，Ddr2经由过程调治Adcy5-cAMP-PKA路子调治脂肪细胞脂解以及骨量。展现了靶向脂肪细胞Ddr2作为医治肥胖以及低骨量疾病的潜力。